數字PCR儀實現了定量及稀有等位基因的檢測

　　數字PCR儀是一種核酸檢測和定量分析的新方法，可以作為傳統實時定量PCR的替代方法，以實現一致定量及稀有等位基因的檢測。數字PCR的工作原理在于將DNA或cDNA樣品分割為許多單獨、平行的PCR反應，部分這些反應包含了靶標分子（陽性），而其他不包含（陰性）。單個分子可以被擴增一百萬倍或更多。在擴增期間，TaqMan化學試劑及染料標記探針可用于檢測特定序列的靶標。當不存在任何靶標序列時，沒有信號累積。PCR分析后，陰性反應片段用于生成樣品中靶標分子的一致計數，而無需標準品或內標。

　　納流芯片的使用提供了便捷和直觀的機制來同時平行運行上千個PCR反應。每個孔都加入了樣品、擴增混合物和TaqMan測定試劑的混合物，然后進行單獨分析以檢測存在（陽性）或不存在（陰性）終點信號?？紤]到孔可能接收到多個靶標序列分子，使用泊松模型應用了一個校正因子。

　　數字PCR儀和試劑能夠提高現有TaqMan測定的性能，從而實現更高的靈敏度、精度和一致定量，使應用從中獲益。

　　PCR就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內InVitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制。在使用PCR儀的過程中需要注意以下事項：

　　1）環境要恒定，運作環境的溫度不能過高或過低，在用空調的房間使用，有些PCR儀有溫度保護程序，在過低的溫度下機器不能啟動。

　　2）電源要穩定，工作的電壓不能波動過大，波動過大會造成電子器件損壞，一般建議將PCR儀電源接于穩壓電源上。

　　3）盡量不要保存過夜，能經常使用就不容易壞。

　　4）數字PCR儀在使用前要詳細閱讀使用說明書，遇到不能解決的問題不要隨意拆卸儀表，打電話咨詢廠家或技術支持部門，通過指導進行維修。